Interacciones proteína-proteína

Interacciones proteína-proteína se refiere a la asociación de proteínas y el estudio de esas asociaciones desde las perspectivas de la Bioquímica, transducción de señales y redes de interacción de proteínas.

Las interacciones entre proteínas son importantes en muchos procesos biológicos. Por ejemplo, las interacciones proteína-proteína de las moléculas de señalización median el paso al interior de la célula señales procedentes del exterior. Este proceso, llamado transducción de señales, juega un papel fundamental en muchos procesos biológicos y enfermedades (ej. cáncer). Las proteínas pueden interactuar durante mucho tiempo para formar parte de un complejo proteínico; o pueden transportar a otra proteína (por ejemplo, desde el citoplasma al núcleo o viceversa en el caso de las importinas de los poros nucleares), o pueden interactuar brevemente con otra proteína para modificarla (por ejemplo, una proteína kinasa puede fosforilar a una proteína objetivo). Esta modificación de proteínas puede cambiar por sí misma la interacción protéica. Por ejemplo, algunas proteínas con dominios SH2 sólo se unen a proteínas cuando están fosforiladas en el aminoácido Tirosina. En definitiva, las interacciones proteína-proteína tienen una importancia capital en prácticamente todos los procesos en una célula viva. La información acerca de esas interacciones mejora nuestro conocimiento sobre las enfermedades y puede proporcionar las bases para nuevos enfoques de los tratamientos terapéuticos.

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Métodos para investigar las interacciones proteína-proteína

Debido a que las interacciones proteícas son tan importantes, existe una multitud de métodos para detectarlas. Cada uno de los enfoques tiene sus propios pros y contras, especialmente en cuanto a la sensibilidad y especificidad del método. Una gran sensibilidad significa que muchas de las interacciones que ocurren en realidad son detectadas por el método, mientras que una gran especificidad indica que la mayoría de las interacciones detectadas ocurren realmente (pocos falsos-positivos)

• Co-inmunoprecipitación: es considerado el mejor ensayo para detectar las interacciones proteína-proteína, especialmente cuando se realiza con proteínas endógenas (ni sobreexpresadas ni marcadas). La proteína de interés se aisla con un anticuerpo específico. Las moléculas que interaccionan con la proteína se identifican posteriormente mediante un "western blot".

• Ensayo de doble híbrido en levadura: investiga la interacción entre proteínas de fusión artificiales en el interior del núcleo de una levadura. Este método puede identificar moléculas que se unen a una proteína dada de forma inequívoca. No obstante, este método tiene una considerable tasa de falsos-positivos, lo que hace necesario verificar las interaciones identificadas mediante un ensayo de co-inmunoprecipitación.

• "Tandem affinity purification" (TAP): detecta interacciones en el ambiente celular real (ej. en el citosol de una célula de mamífero)(Rigaut et al., 1999). Esto supone una gran ventaja comparado con el ensayo de doble híbrido. Una desventaja importante es que la purificación de proteínas se realiza mediante dos lavados, de forma que no puede detectar interacciones proteína-proteína transitorias.

• Inmunoprecipitación cuantitativa combinada con "knok-out" (QUICK - Quantitative inmunoprecipitation combined with knock-out): se basa en la co-inmunoprecipitación, la espectrometría de masa cuantitativa (SILAC) y la interferencia de ARN (RNA interference - RNAi). Este método detecta interacción entre proteínas endógenas sin marcar (Selbach and Mann, 2006), de modo que tiene la misma fiabilidad que la co-inmunoprecipitación, aunque depende también de la disponibilidad de anticuerpos adecuados.

• "Dual Polarisation Interferometry (DPI)": puede usarse para medir interacciones proteína-proteína. DPI proporciona medidas de tamaño molecular, densidad y masa, en tiempo real y con alta resolución.

Bases de Datos de interacciones entre proteínas

• BioGRID es un catálogo público sobre interacciones entre proteínas y genéticas. [1]
• HPRD Human Protein Reference Database base de datos con información sobre proteínas humanas.
• The MIPS Mammalian Protein-Protein Interaction Database
• IntAct Interaction Database es un catálogo público con información sobre interacción molecular
• APID Agile Protein Interaction DataAnalyzer es una herramienta informática interactiva que permite explorar y analizar la información actual, sobre interacciones entre proteínas, en una plataforma única y comparativa.
• Database of Interacting Proteins, un catálogo manual y automático de interacciones, entre proteínas, determinadas experimentalmente.

Redes de interacción proteína-proteína

La creación de herramientas visuales para representar las redes de interacciones entre proteínas es una aplicación popular de la informática gráfica. A pesar de que los diagramas de interacción proteícos son habituales en los libros de textos , los diagramas que representan por completo la red de interacción entre proteínas no son tan comunes debido a su complejidad. El mapa del control del ciclo celular de Kurt Kohn (1999) es un ejemplo de una red de interacción molecular hecha a mano [Mol Biol Cell. 1999]. Sobre el mapa de Kohn, Schwikowski, Uetz, and Fields (2000) publicaron un artículo sobre las interacciones proteína-proteína en levadura, combinando 1548 proteínas determinadas mediante "Two hybrid", usando un "force-directed (Sugiyama) graph drawing algorithm" para generar de forma automática una imagen de la red. [Nature 2000]. Desde entonces, se han desarrollado otros sistemas para automatizar la creación de redes de interacción entre proteínas, incluyendo:

• Osprey
• VisANT
• NAViGaTOR
• Cytoscape es una herramienta informática de código abierto para crear gráficos sobre interacciones moleculares e integrarlas con perfiles de expresión de genes y otros datos
• yEd es un potente editor gráfico. Se puede utilizar para construir gráficos y aplicar automáticamente diseños para varios tipos de diagramas y redes.
• NetPro

Muchas de las bases de datos, sobre interacciones entre proteínas mostradas arriba, contienen herramientas de visualización para ayudar al usuario a manejar los datos.

Véase también

Proteína

Transducción de señales

Referencias bibliográficas

• Rigaut G, Shevchenko A, Rutz B, Wilm M, Mann M, Seraphin B (1999) A generic protein purification method for protein complex characterization and proteome exploration. Nat Biotechnol. 17:1030-2. PMID: 10504710
• Selbach M, Mann M. (2006) Protein interaction screening by quantitative immunoprecipitation combined with knockdown (QUICK). Nat Methods. 3:981-3. PMID: 17072306