Método Kirby-Bauer

El Metodo Kirby-Bauer es empleado para determinar la sensibilidad de un agente microbiano frente a un antibiótico o quimioterápico. Este método comprende lo que se denomina un antibiograma o prueba de suseptibilidad bacteriana frente a drogas específicas.

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Forma de aplicación

Sobre la superficie de una placa de agar Müller-Hinton (medio de cultivo rico, diseñado especialmente para hacer ensayos de sensibilidad) se inocula una cantidad estandarizada de bacterias, sembrándolas en forma pareja para obtener después de la inoculación un "cesped" bacteriano. A continuación se colocan discos de papel filtro impregnados con concentraciones conocidas de los diferentes antibióticos. El antibiótico difundirá desde el papel filtro al agar en forma radial. Se incuba la placa por 18 horas a 37ºC, luego se miden los halos de inhibición de desarrollo y se interpretan de acuerdo a tablas confeccionadas previamente. Los resultados se expresan como: Sensible (S), Intermedio o Moderadamente sensible (I) y Resistente (R).

Comportamiento de Inhibición

El tamaño del halo de inhibición de desarrollo se debe a las siguientes posibilidades:

1.- La concentración de la droga 2.- Sensibilidad bacteriana 3.- Coeficiente de difución de la droga en el agar 4.- Tiempo y Temperatura de incubación 5.- pH y composición del medio. Se usan preparados comerciales que den resultados reproducibles, por ejemplo: Agar Müller-Hinton. Son cultivos aceptados por el comité de la OMS para la normaliazación de las pruebas de suseptibilidad 6.- Profundidad del medio en las placas. Esto está estandarizado: se emplean placas de 9 cm.de diámetro, y se agrega siempre el mismo volumen de medio de cultivo: 15 ml. por placa. De esta manera las palcas poseen simpre la misma altura de agar 7.- Tamaño del inóculo. Debe estar estandarizado ya que si éste es nuy pequeño dará una sensibilidad mayor de a la real y si el inóculo es muy denso pueden aparecer mutabtes resistentes. En los métodos de difusión de mutantes resistentes aparecen como colonias aisladdas dentro del halo de inhibición, por lo tanto esto indica que no se puede usar ese antibiótico y se debe informar como resistente. La forma rigurosa de estandarizar un inóculo es normalizando la turbidez por un método fotométrico utilizando una suspención de Sulfato de Bario como estándar, segun escala de Mac Farland.

Errores al realizar un Antibiograma

Dentro de las posibilidades que se cuentan están: Densidad del inóculo mal estandarizado, usar cultivos no puros, humedad o sequedad excesiva del medio de cultivo que puede conducir a un crecimiento damasiado cofluente o pobre y deterioro de los discos de aplicación.